作者liner76 (歐~天呀)
看板Biotech
標題[求救] 大鼠抽血溶血
時間Sun May 31 19:09:28 2009
各位前輩,小弟想請教個問題
最近實驗是做大鼠尾動脈採血
使用的針頭是23G 5mL的..抽取1~1.5mL
可是最近常發現後來的plasma分離常會有些微溶血的現象
想問看看是否是步驟上有錯誤
1 抽血前先把大鼠用乙醚迷昏
2 翻肚後順尾巴,直到尾動脈浮起
3 針頭呈15度角下針
4 抽取時在等待血液流到針筒中
(此步驟可能會偶爾會停留直到血量足夠才停止抽血,有時可能下針角度不好
造成抽取時發現算是漸慢慢的抽出來,可能有點小氣泡)
5 拔掉針頭,用慢慢滴的方式滴入含抗凝劑的tube中
(有時注入到最後的血量,會打進一些血泡到tube中)
6 離心700~1000 xg分離 血球& plasma
以上的步驟做下來,部分的sample會些微溶血
(不是很明顯的紅色,是plasma有點橙or紅色) 完全沒溶血的plasma偏向透明
想請問說以上的步驟是不是有會造成溶血的問題?
懇請解答,謝謝!!
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◆ From: 218.164.226.245
※ 編輯: liner76 來自: 218.164.226.245 (05/31 19:10)
1F：推 keith0607:針筒抽血多少都會,離心時轉速提高 或是 採用眼窩採血 05/31 23:40
2F：→ liner76:那轉速要提高多少較恰當? 06/01 00:17
3F：推 mbig:有點好奇hiparin 事先放在針筒內跟事後加有差異嗎 06/01 02:25
4F：推 keith0607:rpm.與g值...轉換有公式, 我是固定3000 rpm. 15 min 06/01 09:15
5F：→ keith0607:heparin加入是可以抗凝血, 但抽血過程使用針筒, 改善空 06/01 09:16
6F：→ keith0607:改善空間有限 06/01 09:17
7F：推 undeadfish:rpm和g的轉換公式要有半徑這個數值 樓上只說rpm沒甚麼 06/01 10:35
8F：→ undeadfish:用 06/01 10:35
9F：推 stray0115:我們實驗室離心都用2000g不會凝血 你可以試試看 06/01 10:55
10F：→ liner76:所以意思是..離心過程有可能會造成血球破裂QQ 06/01 11:31
11F：→ liner76:抽血過程中,針頭的粗細也有可能造成血球破裂囉? 06/01 11:32
12F：→ liner76:今天我會試試提高離心速度看看,謝謝各位 06/01 11:33
13F：推 nutahoshi:溶血跟離心或許有關係~但不是絕對吧 06/01 11:46
14F：推 nutahoshi:我抽血的方式跟原PO一樣.有時會溶血.有時則不會 06/01 11:50
15F：→ nutahoshi:建議抽血時慢慢抽~抽完降溫就離心~比較不會有溶血的產生 06/01 11:52
17F：推 soceress:抽血要慢..就是..就算血出來的速度很慢也不要把針筒抽真 06/12 21:46
18F：→ soceress:空的space拉很大 06/12 21:46