作者liner76 (欧~天呀)
看板Biotech
标题[求救] 大鼠抽血溶血
时间Sun May 31 19:09:28 2009
各位前辈,小弟想请教个问题
最近实验是做大鼠尾动脉采血
使用的针头是23G 5mL的..抽取1~1.5mL
可是最近常发现後来的plasma分离常会有些微溶血的现象
想问看看是否是步骤上有错误
1 抽血前先把大鼠用乙醚迷昏
2 翻肚後顺尾巴,直到尾动脉浮起
3 针头呈15度角下针
4 抽取时在等待血液流到针筒中
(此步骤可能会偶尔会停留直到血量足够才停止抽血,有时可能下针角度不好
造成抽取时发现算是渐慢慢的抽出来,可能有点小气泡)
5 拔掉针头,用慢慢滴的方式滴入含抗凝剂的tube中
(有时注入到最後的血量,会打进一些血泡到tube中)
6 离心700~1000 xg分离 血球& plasma
以上的步骤做下来,部分的sample会些微溶血
(不是很明显的红色,是plasma有点橙or红色) 完全没溶血的plasma偏向透明
想请问说以上的步骤是不是有会造成溶血的问题?
恳请解答,谢谢!!
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◆ From: 218.164.226.245
※ 编辑: liner76 来自: 218.164.226.245 (05/31 19:10)
1F：推 keith0607:针筒抽血多少都会,离心时转速提高 或是 采用眼窝采血 05/31 23:40
2F：→ liner76:那转速要提高多少较恰当? 06/01 00:17
3F：推 mbig:有点好奇hiparin 事先放在针筒内跟事後加有差异吗 06/01 02:25
4F：推 keith0607:rpm.与g值...转换有公式, 我是固定3000 rpm. 15 min 06/01 09:15
5F：→ keith0607:heparin加入是可以抗凝血, 但抽血过程使用针筒, 改善空 06/01 09:16
6F：→ keith0607:改善空间有限 06/01 09:17
7F：推 undeadfish:rpm和g的转换公式要有半径这个数值 楼上只说rpm没甚麽 06/01 10:35
8F：→ undeadfish:用 06/01 10:35
9F：推 stray0115:我们实验室离心都用2000g不会凝血 你可以试试看 06/01 10:55
10F：→ liner76:所以意思是..离心过程有可能会造成血球破裂QQ 06/01 11:31
11F：→ liner76:抽血过程中,针头的粗细也有可能造成血球破裂罗? 06/01 11:32
12F：→ liner76:今天我会试试提高离心速度看看,谢谢各位 06/01 11:33
13F：推 nutahoshi:溶血跟离心或许有关系~但不是绝对吧 06/01 11:46
14F：推 nutahoshi:我抽血的方式跟原PO一样.有时会溶血.有时则不会 06/01 11:50
15F：→ nutahoshi:建议抽血时慢慢抽~抽完降温就离心~比较不会有溶血的产生 06/01 11:52
17F：推 soceress:抽血要慢..就是..就算血出来的速度很慢也不要把针筒抽真 06/12 21:46
18F：→ soceress:空的space拉很大 06/12 21:46