作者littlelizard (專注)
站內Biotech
標題[求救] 請問protease種類
時間Tue May 26 18:25:18 2009
如題~
生產的重組蛋白一直會被切掉 His-tag
對我後續純化很不利
預測出protease的可能切位後
得到結果如下
115: LysN
116: LysC, Pepsin (pH1.3), Pepsin (pH>2), Thermolysin, Trypsin
117: Chymotrypsin-low specificity (C-term to [FYWML], not before P),
Pepsin (pH1.3), Pepsin (pH>2), Proteinase K, Thermolysin
118: Proteinase K
我只知道protease分成4大類
1. Metal protease
2 Serine protease
3. Cysteine protease
4. Aspartyl protease
想請問大家
有沒有什麼文獻或是書籍可以查詢protease的種類?
我上網找了很久得到的資訊有限
只知道LysN是屬於metal protease
Glutamyl endopeptidase, Staphylococcal peptidase I 是屬於 Aspartyl protease
如果知道這些protease屬於哪一類
我想加入相對應的protease inhibitor去試試看有無改善His-tag斷掉情形
謝謝
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.74.19
1F：→ leoblack:protease inhibitor cocktail不能用嘛?!比單買便宜吧~ 05/26 19:01
2F：→ littlelizard:我記得滿貴的? 上次學姐跟我說多少錢我忘了 05/26 21:17
3F：→ littlelizard:請問樓上是買哪家? 報價多少呢? 謝謝 05/26 21:17
4F：推 shunwang:有沒有可能是His後緊接Met 造成從後面開始translation 05/27 07:09
5F：→ littlelizard:回樓上 有確定過ORF了 tag後就是stop codon 05/27 19:14
6F：推 shunwang:原來是接在C端 你有使用 anti-His 確認 his-tag消失了嗎 05/27 20:44
7F：→ shunwang:因還有一種可能 native態純化時 his-tag 被藏起來了 05/27 20:45
8F：→ littlelizard:有阿~做過western 之前的學姐有打MS確認斷掉的位置 05/28 12:49
9F：→ littlelizard:原文就是預估出來會切的protease 05/28 12:50