作者catsheep (真是不可思議)
看板Biotech
標題Re: [求救] 請問MTT assay單位 OD如何轉換成VIABIL …
時間Mon May 18 17:30:28 2009
※ 引述《mijawang (mjwang)》之銘言：
: 想請問有做過細胞存活率測試的各位 譬如MTT WST-1等 都是測其吸光値
: 要如何將縱軸單位轉換成 cell viability(%)??
: 像我們實驗室之前作mtt 測其OD 570nm後 學長姐們都是用od來做縱軸圖
: 可是今天我做完材料細胞毒性測試 想要比較存活率
: 並以在tcps上培養且未含材料的細胞量作control 且用此control作為基準値
: 就像我在期刊上有看到 test/control * 100
: 那要如何得到縱軸cell viability(%)??是要做細胞量 v.s. OD値之間檢量線嗎?
: 另外 想請問大家測MTT的時候 會有BLANK嗎? 若有 BLANK是什麼呢?
: 像我們實驗室是用DMSO去溶 再分裝至96-WELL去測 所以BLANK就是DMSO這樣嗎?
: 感謝各位了!
: ※ 編輯: mijawang 來自: 140.120.135.124 (05/18 15:53)
: 推 leoblack:MTT是定義出"相對"存活率不是"絕對"存活率~請跟control比 05/18 16:45
: → mijawang:我知道啊 所以那數値是直接OD値去除?? 05/18 16:55
: → mijawang:譬如我的CONTROL吸光値為1.0 樣品吸光値為0.8 05/18 16:56
不是這樣算喔
: → mijawang:所以CELL VIABILITY為0.8/1.0*100=80% 這樣?? 05/18 16:57
你要先作一組standard curve(問妳們家學長姐 他們一定知道)
由standard curve 計算出細胞成長的公式(我都會讓R平方值>0.9)
比方說 R2 = 0.99152446 y = 0.00005679 x + 0.08809291
control= 1.0 1.0 = 0.00005679x+0.08809291 計算出 Xcontrol
sample = 0.8 0.8 = 同上 計算出 Xsample
Xcontrol / Xsample = 細胞存活率
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◆ From: 140.114.44.75
1F：推 blence:細胞生長曲線跟MTT吸光值代表細胞數是兩回事,不要混為一談 05/18 17:56
2F：推 tsubasawolfy:我不懂為啥要求standard curve後下去比... 05/18 18:00
3F：推 mijawang:所以?? 到底要如何才能把縱軸OD値換為cell viavility(%)? 05/18 18:06
4F：→ mijawang:不曉得大家是怎樣去表示的? 05/18 18:07
5F：推 supray:OD在某範圍內是線性的 這要試試你的cell線性範圍在哪 05/18 18:52
6F：→ supray:在這範圍內的OD值 test/control 就能直接換算成% 05/18 18:53
8F：推 supray:就種1盤連續稀釋的細胞 然後做OD的standard curve 05/18 18:59
9F：→ supray:找到線性範圍 你的種的control也不能爆表 05/18 19:00
10F：→ supray:細胞數是自己種的跟生長曲線沒關 05/18 19:01
11F：推 supray:所有的OD都要扣掉blank的OD blank就是你的原點 05/18 19:24