作者catsheep (真是不可思议)
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标题Re: [求救] 请问MTT assay单位 OD如何转换成VIABIL …
时间Mon May 18 17:30:28 2009
※ 引述《mijawang (mjwang)》之铭言：
: 想请问有做过细胞存活率测试的各位 譬如MTT WST-1等 都是测其吸光値
: 要如何将纵轴单位转换成 cell viability(%)??
: 像我们实验室之前作mtt 测其OD 570nm後 学长姐们都是用od来做纵轴图
: 可是今天我做完材料细胞毒性测试 想要比较存活率
: 并以在tcps上培养且未含材料的细胞量作control 且用此control作为基准値
: 就像我在期刊上有看到 test/control * 100
: 那要如何得到纵轴cell viability(%)??是要做细胞量 v.s. OD値之间检量线吗?
: 另外 想请问大家测MTT的时候 会有BLANK吗? 若有 BLANK是什麽呢?
: 像我们实验室是用DMSO去溶 再分装至96-WELL去测 所以BLANK就是DMSO这样吗?
: 感谢各位了!
: ※ 编辑: mijawang 来自: 140.120.135.124 (05/18 15:53)
: 推 leoblack:MTT是定义出"相对"存活率不是"绝对"存活率~请跟control比 05/18 16:45
: → mijawang:我知道啊 所以那数値是直接OD値去除?? 05/18 16:55
: → mijawang:譬如我的CONTROL吸光値为1.0 样品吸光値为0.8 05/18 16:56
不是这样算喔
: → mijawang:所以CELL VIABILITY为0.8/1.0*100=80% 这样?? 05/18 16:57
你要先作一组standard curve(问你们家学长姐 他们一定知道)
由standard curve 计算出细胞成长的公式(我都会让R平方值>0.9)
比方说 R2 = 0.99152446 y = 0.00005679 x + 0.08809291
control= 1.0 1.0 = 0.00005679x+0.08809291 计算出 Xcontrol
sample = 0.8 0.8 = 同上 计算出 Xsample
Xcontrol / Xsample = 细胞存活率
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.114.44.75
1F：推 blence:细胞生长曲线跟MTT吸光值代表细胞数是两回事,不要混为一谈 05/18 17:56
2F：推 tsubasawolfy:我不懂为啥要求standard curve後下去比... 05/18 18:00
3F：推 mijawang:所以?? 到底要如何才能把纵轴OD値换为cell viavility(%)? 05/18 18:06
4F：→ mijawang:不晓得大家是怎样去表示的? 05/18 18:07
5F：推 supray:OD在某范围内是线性的 这要试试你的cell线性范围在哪 05/18 18:52
6F：→ supray:在这范围内的OD值 test/control 就能直接换算成% 05/18 18:53
8F：推 supray:就种1盘连续稀释的细胞 然後做OD的standard curve 05/18 18:59
9F：→ supray:找到线性范围 你的种的control也不能爆表 05/18 19:00
10F：→ supray:细胞数是自己种的跟生长曲线没关 05/18 19:01
11F：推 supray:所有的OD都要扣掉blank的OD blank就是你的原点 05/18 19:24