作者Bcl2 (This is "L2")
看板Biotech
標題[求救] 又是lentivirus的問題...
時間Mon May 18 13:53:51 2009
這個對於well-trained的lentivirus user來說應該是很簡單的問題^^"
我打算利用帶有GFP的lentivirus
對我們家之前自己收到的primary cancer cells建立帶有螢光的stable clone
但感染完之後(follow 中研院RNAi core的protocol)
以puro 2ug/ml篩選
最後雖然可以篩得出有發螢光的細胞(其實也不多 不管增量還是減量都一樣orz)
但這些細胞和未處理的比較
生長狀況明顯變差
至於293T
因為目前所剩病毒量有限
目前並沒有再對293T做virus的活性測試
所以不知大家覺得
如果我要trouble shooting的話
會比較建議從細胞還是病毒下手?
感恩~~~<(_ _)>
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 203.64.247.100
1F：推 leoblack:follow中研院RNAi的protocal?!那vector也是嘛?! 05/18 14:56
2F：→ leoblack:RNAi用的lenti-promoter跟大量表現用promoter有相同嘛?! 05/18 14:57
3F：推 aceliang:中研院用的control是用CMV promoter，原po是用這隻吧？ 05/18 15:30
4F：→ aceliang:應該不會自己去康U6 promoter的reporter gene吧?? 05/18 15:31
5F：→ Bcl2:回一樓: Yes..還有那個lenti的promotor..我得再查一下~^^" 05/18 20:26
6F：推 leoblack:印象中~要大量表現~不應該用RNAi系統的promoter喔~ 05/19 02:14