作者Bcl2 (This is "L2")
看板Biotech
标题[求救] 又是lentivirus的问题...
时间Mon May 18 13:53:51 2009
这个对於well-trained的lentivirus user来说应该是很简单的问题^^"
我打算利用带有GFP的lentivirus
对我们家之前自己收到的primary cancer cells建立带有萤光的stable clone
但感染完之後(follow 中研院RNAi core的protocol)
以puro 2ug/ml筛选
最後虽然可以筛得出有发萤光的细胞(其实也不多 不管增量还是减量都一样orz)
但这些细胞和未处理的比较
生长状况明显变差
至於293T
因为目前所剩病毒量有限
目前并没有再对293T做virus的活性测试
所以不知大家觉得
如果我要trouble shooting的话
会比较建议从细胞还是病毒下手?
感恩~~~<(_ _)>
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 203.64.247.100
1F：推 leoblack:follow中研院RNAi的protocal?!那vector也是嘛?! 05/18 14:56
2F：→ leoblack:RNAi用的lenti-promoter跟大量表现用promoter有相同嘛?! 05/18 14:57
3F：推 aceliang:中研院用的control是用CMV promoter，原po是用这只吧？ 05/18 15:30
4F：→ aceliang:应该不会自己去康U6 promoter的reporter gene吧?? 05/18 15:31
5F：→ Bcl2:回一楼: Yes..还有那个lenti的promotor..我得再查一下~^^" 05/18 20:26
6F：推 leoblack:印象中~要大量表现~不应该用RNAi系统的promoter喔~ 05/19 02:14