大家好！我目前的實驗所採取的細胞是 A10 大鼠平滑肌胞株 本實驗室學姊說給藥前要 serum starvation 24 小時 讓細胞停止生長 可是我自己做了幾次後發現 serum starvation 僅僅 3 小時後 原本貼得好好的肌肉細胞很多都浮起來死了...而且還蠻多的 更何況是 24 小時 ￣⊿￣||| （在顯微鏡下看起來浮起來一大堆） 再加上給藥24小時，共48小時 serum starvation (在顯微鏡下看起來，只剩10%還貼著吧) 是不是這個因素導致我想要看的蛋白質在每次 Western blot 的結果看來都不一致 而且我自己偷偷做了 serum starvation 的 time course 發現在48小時內，僅僅 serum starvation 的情況下 我想要看的蛋白質的表現量就一直在變化，時多時少 .... 所以如果我想要看一個藥物對於 A10 的某蛋白質表現量 serum starvation 這個前處理是不是沒有必要做，以免因此屏蔽了藥物的作用 （或是變成要看該藥物的另一種作用 = =） 還是我的 medium 要含有 1% or 5% FBS，而不是 0% 其實我自己也試了在沒有 serum starvation 的情況下給藥 不過似乎就看不到藥物對該蛋白質的影響 = =||| 我自己查文獻的結果，發現要看這個蛋白質的細胞實驗，也是有 serum starvation 雖然給的藥物不同，但是文獻上的 Western blot 結果圖的control組都很淡 不像我做的...有時深有時淺 雖然說使用的細胞株不同啦...但真的很奇怪 老闆又一直再 murmur....真的快瘋掉了 麻煩版友給些寶貴的意見，感激不盡 --

※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 192.192.93.47