作者hughzero (雨人)
看板Biotech
標題[求救] 從一堆雜細胞中抽取特定細胞的RNA
時間Sat Apr 11 11:16:48 2009
板上的各位先進好
最近在實驗上有遇到一些問題想向各位討教一下
我的實驗是從PBMC中培養出某一特定的細胞
依照前人的作法是將Ficoll分出來的所有PBMC放在fibronectin coating的well上
讓其貼附四天，使我要的細胞可以貼附在well上
不過最近在抽取我要的細胞的RNA時卻發現了一個很大的問題
由於我要的細胞，其數量在PBMC中很少
而且在貼附的過程，也有其他不是我要的細胞貼上去
這樣一來，抽RNA上就有很大一部分並非是我要的RNA
使我的實驗數據受到質疑
當然我也有事先wash，不過效果有限
有時候還會將我要的細胞洗下來
不知道板上有沒有遇過這種問題的前輩
又是如何解決的呢
謝謝各位
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◆ From: 123.192.76.157
1F：推 saviora:先用抗體將想要的細胞弄下來再做實驗 04/11 12:20
2F：→ hughzero:可是這細胞本身並沒有specific的marker，這樣的話還是會 04/11 13:03
3F：→ hughzero:有其他細胞混雜在一起 04/11 13:03
4F：推 sisyphus:sorting? 04/11 13:17
5F：→ hughzero:有想過，但是老闆認為成本太高了，不划算... 04/11 21:23
6F：推 EosTwo:如果可是用肉眼辨識的話,有種機器可以把細胞吸出來.. 04/12 14:38
7F：→ hughzero:細胞型態的確可以用肉眼分辨出來，請問E大指的機器叫什麼 04/12 15:49
9F：→ EosTwo:我也沒用過這機器 只是看過介紹 04/12 22:24