作者hughzero (雨人)
看板Biotech
标题[求救] 从一堆杂细胞中抽取特定细胞的RNA
时间Sat Apr 11 11:16:48 2009
板上的各位先进好
最近在实验上有遇到一些问题想向各位讨教一下
我的实验是从PBMC中培养出某一特定的细胞
依照前人的作法是将Ficoll分出来的所有PBMC放在fibronectin coating的well上
让其贴附四天，使我要的细胞可以贴附在well上
不过最近在抽取我要的细胞的RNA时却发现了一个很大的问题
由於我要的细胞，其数量在PBMC中很少
而且在贴附的过程，也有其他不是我要的细胞贴上去
这样一来，抽RNA上就有很大一部分并非是我要的RNA
使我的实验数据受到质疑
当然我也有事先wash，不过效果有限
有时候还会将我要的细胞洗下来
不知道板上有没有遇过这种问题的前辈
又是如何解决的呢
谢谢各位
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◆ From: 123.192.76.157
1F：推 saviora:先用抗体将想要的细胞弄下来再做实验 04/11 12:20
2F：→ hughzero:可是这细胞本身并没有specific的marker，这样的话还是会 04/11 13:03
3F：→ hughzero:有其他细胞混杂在一起 04/11 13:03
4F：推 sisyphus:sorting? 04/11 13:17
5F：→ hughzero:有想过，但是老板认为成本太高了，不划算... 04/11 21:23
6F：推 EosTwo:如果可是用肉眼辨识的话,有种机器可以把细胞吸出来.. 04/12 14:38
7F：→ hughzero:细胞型态的确可以用肉眼分辨出来，请问E大指的机器叫什麽 04/12 15:49
9F：→ EosTwo:我也没用过这机器 只是看过介绍 04/12 22:24