作者apa9394 (委員長老虎)
看板Biotech
標題[求救] 請問細胞的IHC固定法
時間Fri Apr 10 11:29:23 2009
各位板友及前輩好
最近小弟要做細胞的IHC
想要用甲醇,甲醛 或是福馬林固定
請問這三個固定的特性為何
因為抗體是要進細胞核的
以前做tissue染細胞核的protein 都是福馬林固定用citric acid煮沸
請問細胞也需要citric acid煮沸嗎?
感恩
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◆ From: 140.129.77.148
1F：推 nzj:福馬林不就是甲醛嗎 04/10 13:05
2F：推 allisa:細胞不用吧 記得需要retrieval是由於蠟塊包埋的過程中 04/10 14:29
3F：→ allisa:會使得抗體辨認位置有點變性所以才要做retrieval 04/10 14:30
4F：推 iiidns:染細胞核需要 只是差別在加熱時間長短 04/10 18:37
5F：推 humwang:若是要染核蛋白的話,建議用冰甲醇固定30秒到一分鐘 04/10 20:47
6F：→ humwang:因為用PFA固定後還要用triton X-100在膜上打洞 04/10 20:48
7F：→ humwang:這種打洞的效果在細胞膜上不錯,但是在核膜上不佳 04/10 20:49
8F：→ humwang:短時間的冰甲醇固定是能把細胞膜跟核膜都部分溶解 04/10 20:51
9F：→ humwang:所以之後要染核蛋白時,有利於抗體進入核中 04/10 20:51
10F：→ apa9394:感謝各位先進的建議 小弟會試試看的 感恩<(_ _)> 04/12 16:03