作者apa9394 (委员长老虎)
看板Biotech
标题[求救] 请问细胞的IHC固定法
时间Fri Apr 10 11:29:23 2009
各位板友及前辈好
最近小弟要做细胞的IHC
想要用甲醇,甲醛 或是福马林固定
请问这三个固定的特性为何
因为抗体是要进细胞核的
以前做tissue染细胞核的protein 都是福马林固定用citric acid煮沸
请问细胞也需要citric acid煮沸吗?
感恩
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.129.77.148
1F：推 nzj:福马林不就是甲醛吗 04/10 13:05
2F：推 allisa:细胞不用吧 记得需要retrieval是由於蜡块包埋的过程中 04/10 14:29
3F：→ allisa:会使得抗体辨认位置有点变性所以才要做retrieval 04/10 14:30
4F：推 iiidns:染细胞核需要 只是差别在加热时间长短 04/10 18:37
5F：推 humwang:若是要染核蛋白的话,建议用冰甲醇固定30秒到一分钟 04/10 20:47
6F：→ humwang:因为用PFA固定後还要用triton X-100在膜上打洞 04/10 20:48
7F：→ humwang:这种打洞的效果在细胞膜上不错,但是在核膜上不佳 04/10 20:49
8F：→ humwang:短时间的冰甲醇固定是能把细胞膜跟核膜都部分溶解 04/10 20:51
9F：→ humwang:所以之後要染核蛋白时,有利於抗体进入核中 04/10 20:51
10F：→ apa9394:感谢各位先进的建议 小弟会试试看的 感恩<(_ _)> 04/12 16:03