作者abbyyam (ㄟ逼)
看板Biotech
標題Re: [求救] Western 的band糊糊的
時間Wed Apr 8 20:25:25 2009
※ 引述《abbyyam (ㄟ逼)》之銘言：
: 小弟最近做Western遇到的困擾是我的Target protein的band都糊糊的
: 不夠shape，所以讓老闆非常的不滿
: 但是在actin的部分就很OK
: 我的target protein的大小是50~55kDa左右
: 膠用過10%和12%的
: Transfer是400mA 2.5hr (in ice bath)
: 所以到底是哪邊出了問題呢?
: 煩請幫忙 > <
http://www.wretch.cc/album/album.php?id=abbyyam&book=12
圖在此
另外我跑膠是用80V和100V在跑的
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 203.64.247.100
1F：推 alaric:你的SDS-PAGE用CBR stain的image ?? 04/08 20:30
2F：推 tsubasawolfy:蛋白量太多- - 04/08 20:40
3F：推 humwang:是glycoprotein嗎? 若是的話. 也有可能是這樣的 04/08 21:02
4F：推 kirby0415:是用底片壓片的嗎? 04/08 22:28
5F：推 rickson:不錯漂亮阿 04/08 22:28
6F：→ abbyyam:是用照的不是用壓片的 04/09 16:09
7F：推 tsk:我也覺得蛋白量過多耶 04/09 20:02
8F：推 bigcat24:我用過冷光儀照相及壓片 覺得壓片還是比較sharp哩 04/10 08:45
9F：推 blence:先不管照相與壓片優劣,我看到很多會照相模糊都是focus跑掉 04/10 10:35
10F：→ blence:使用者往往先照相而忘記確認,或根本不知道冷光儀有對焦的事 04/10 10:39
11F：推 tingyi:會不會你的protein其實有很多個isoform呀? 04/10 11:30
12F：推 inchew:試著下不同蛋白量吧 由高至低 看蛋白量低時是否會變sharp 08/10 22:51