作者abbyyam (ㄟ逼)
看板Biotech
标题Re: [求救] Western 的band糊糊的
时间Wed Apr 8 20:25:25 2009
※ 引述《abbyyam (ㄟ逼)》之铭言：
: 小弟最近做Western遇到的困扰是我的Target protein的band都糊糊的
: 不够shape，所以让老板非常的不满
: 但是在actin的部分就很OK
: 我的target protein的大小是50~55kDa左右
: 胶用过10%和12%的
: Transfer是400mA 2.5hr (in ice bath)
: 所以到底是哪边出了问题呢?
: 烦请帮忙 > <
http://www.wretch.cc/album/album.php?id=abbyyam&book=12
图在此
另外我跑胶是用80V和100V在跑的
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 203.64.247.100
1F：推 alaric:你的SDS-PAGE用CBR stain的image ?? 04/08 20:30
2F：推 tsubasawolfy:蛋白量太多- - 04/08 20:40
3F：推 humwang:是glycoprotein吗? 若是的话. 也有可能是这样的 04/08 21:02
4F：推 kirby0415:是用底片压片的吗? 04/08 22:28
5F：推 rickson:不错漂亮阿 04/08 22:28
6F：→ abbyyam:是用照的不是用压片的 04/09 16:09
7F：推 tsk:我也觉得蛋白量过多耶 04/09 20:02
8F：推 bigcat24:我用过冷光仪照相及压片 觉得压片还是比较sharp哩 04/10 08:45
9F：推 blence:先不管照相与压片优劣,我看到很多会照相模糊都是focus跑掉 04/10 10:35
10F：→ blence:使用者往往先照相而忘记确认,或根本不知道冷光仪有对焦的事 04/10 10:39
11F：推 tingyi:会不会你的protein其实有很多个isoform呀? 04/10 11:30
12F：推 inchew:试着下不同蛋白量吧 由高至低 看蛋白量低时是否会变sharp 08/10 22:51