作者drave (( ￣ c￣)y▂ξ)
看板Biotech
標題[問題] PCR及一些生物技術的問題
時間Mon Mar 30 22:56:36 2009
有學過普通的生物化學
但都是粗淺地點到為止...
想問一下
1.
萬一對未知序列跑PCR的時候
那要如何知道要用何種primer?
這樣頭端的鹼基是未知 不就跑不起來了?
2.
接著是RFLP
最後的步驟不是要用探針去hybrid
探針不是設計出來的嗎...怎麼知道要設計怎樣的探針
才能與那些片段hybrid
還是說做RFLP的時候待測DNA也要是已知???
3.
為什麼AFLP比RFLP更能判讀出差異???
AFLP不是就等於RFLP+PCR?
RFLP缺點在於限制酵素切的片段太過多 導致條帶可能會連起來
這樣AFLP跑出來不會有這種情形嗎
還是我哪裡搞錯了?
這樣PCR-RFLP和AFLP有啥不同= ="?
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◆ From: 118.170.185.48
※ 編輯: drave 來自: 118.170.185.48 (03/30 23:29)
1F：推 andy731:有種primer叫做degenerate primer 就是你第一個問題的答案 03/31 01:28
2F：→ drave:是找尋保守區域嗎? 03/31 12:25
3F：→ drave:可是這樣還是無法整段copy不是嗎@@? 03/31 12:25
4F：→ drave:╴╴╴╴╴╴╴╴╴╴╴╴╴╴ 03/31 12:25
5F：→ drave: ▊ 03/31 12:26
6F：→ drave: primer 03/31 12:26
7F：→ drave:[ ] <----那前面這段不就沒有複製到了? 03/31 12:27
8F：推 sGoat:不同實驗用的未知序列引子不同,RFLP可以用random primer 03/31 12:37
9F：→ sGoat:建議你去找一下AFLP及RFLP試驗方法,你看不出差異性是因為試 03/31 12:38
10F：→ sGoat:驗過程太簡潔,漏掉一些敘述... 03/31 12:39