作者drave (( ￣ c￣)y▂ξ)
看板Biotech
标题[问题] PCR及一些生物技术的问题
时间Mon Mar 30 22:56:36 2009
有学过普通的生物化学
但都是粗浅地点到为止...
想问一下
1.
万一对未知序列跑PCR的时候
那要如何知道要用何种primer?
这样头端的硷基是未知 不就跑不起来了?
2.
接着是RFLP
最後的步骤不是要用探针去hybrid
探针不是设计出来的吗...怎麽知道要设计怎样的探针
才能与那些片段hybrid
还是说做RFLP的时候待测DNA也要是已知???
3.
为什麽AFLP比RFLP更能判读出差异???
AFLP不是就等於RFLP+PCR?
RFLP缺点在於限制酵素切的片段太过多 导致条带可能会连起来
这样AFLP跑出来不会有这种情形吗
还是我哪里搞错了?
这样PCR-RFLP和AFLP有啥不同= ="?
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◆ From: 118.170.185.48
※ 编辑: drave 来自: 118.170.185.48 (03/30 23:29)
1F：推 andy731:有种primer叫做degenerate primer 就是你第一个问题的答案 03/31 01:28
2F：→ drave:是找寻保守区域吗? 03/31 12:25
3F：→ drave:可是这样还是无法整段copy不是吗@@? 03/31 12:25
4F：→ drave:╴╴╴╴╴╴╴╴╴╴╴╴╴╴ 03/31 12:25
5F：→ drave: ▊ 03/31 12:26
6F：→ drave: primer 03/31 12:26
7F：→ drave:[ ] <----那前面这段不就没有复制到了? 03/31 12:27
8F：推 sGoat:不同实验用的未知序列引子不同,RFLP可以用random primer 03/31 12:37
9F：→ sGoat:建议你去找一下AFLP及RFLP试验方法,你看不出差异性是因为试 03/31 12:38
10F：→ sGoat:验过程太简洁,漏掉一些叙述... 03/31 12:39