作者andy731 (闇黑小喵喵)
看板Biotech
標題[求救] 有人有做過TRIZOL抽RNA及Protein?
時間Mon Mar 16 11:57:08 2009
請問板上有人有做過TRIZOL同時抽RNA及protein的經驗嗎?
我會這麼問是這樣的...
因為小弟有一組樣品全部處理完需要3個月
當時的構想是
RNA由TRIZOL抽出得到的...(目的是逆轉錄cDNA上real time PCR)
Protein使用一般的方法去分離(因為產量較高) (目的是Westem blotting)
但是實驗跑到一半的時候發現會另外處理protein組會浪費太多珍貴的藥品(管制藥品)
且RNA的樣品目前已經蒐集完畢(還沒抽出)
因此目前考慮改用抽RNA剩下的沉澱物(蛋白質)來取代原本的試驗
不曉得經TRIZOL變性後的蛋白質 抗體抓不抓得到
不曉得有人有這方面的經驗嗎?
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◆ From: 192.83.195.230
1F：推 toshiyablue:以前曾經試過將沉澱物再純化定量跑WB.抗體可以抓的到. 03/16 12:13
2F：→ andy731:請教大大~您是直接將沉澱物直接定量跑WB嗎? 03/16 12:40
3F：→ andy731:還是有使用protocol上的抽出步驟純化protein 03/16 12:41
4F：推 toshiyablue:我是有依照protocol上指示純化.不過建議要跑WB時還是 03/17 16:09
5F：推 toshiyablue:loading足夠的sample量給一抗抓. 03/17 16:15