作者andy731 (闇黑小喵喵)
看板Biotech
标题[求救] 有人有做过TRIZOL抽RNA及Protein?
时间Mon Mar 16 11:57:08 2009
请问板上有人有做过TRIZOL同时抽RNA及protein的经验吗?
我会这麽问是这样的...
因为小弟有一组样品全部处理完需要3个月
当时的构想是
RNA由TRIZOL抽出得到的...(目的是逆转录cDNA上real time PCR)
Protein使用一般的方法去分离(因为产量较高) (目的是Westem blotting)
但是实验跑到一半的时候发现会另外处理protein组会浪费太多珍贵的药品(管制药品)
且RNA的样品目前已经蒐集完毕(还没抽出)
因此目前考虑改用抽RNA剩下的沉淀物(蛋白质)来取代原本的试验
不晓得经TRIZOL变性後的蛋白质 抗体抓不抓得到
不晓得有人有这方面的经验吗?
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 192.83.195.230
1F：推 toshiyablue:以前曾经试过将沉淀物再纯化定量跑WB.抗体可以抓的到. 03/16 12:13
2F：→ andy731:请教大大~您是直接将沉淀物直接定量跑WB吗? 03/16 12:40
3F：→ andy731:还是有使用protocol上的抽出步骤纯化protein 03/16 12:41
4F：推 toshiyablue:我是有依照protocol上指示纯化.不过建议要跑WB时还是 03/17 16:09
5F：推 toshiyablue:loading足够的sample量给一抗抓. 03/17 16:15