作者bbiioo (梅子)
看板Biotech
標題[求救] 小分子蛋白質
時間Sat Mar 7 11:07:50 2009
2-5kDa蛋白質進行N-端定序中的blotting要怎樣才容易轉上去
做了十幾次都轉不上去，跑16% tricine gel都有看見，但是就是轉膜轉不上去
是蛋白質量不夠？還是損失掉了？轉膜時間要多久才適當？
我方法是轉膜時間0.5A轉45分鐘............遲遲無法上去= =
麻煩有經驗的人提供一下方法囉!!
謝謝啦
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◆ From: 140.130.38.65
※ 編輯: bbiioo 來自: 140.130.38.65 (03/07 15:53)
1F：推 alaric:轉膜膜最好用0.22um的. 然後PAGE濃度提高, > 22%吧. 03/07 16:26
2F：→ bbiioo:0.22..不是就PVDF膜 有分孔徑? 03/07 22:01
3F：推 DFS:有的 .45 & .22 03/08 00:15
4F：推 cocoon121:有 有分.45和.22 通常要看<20kda都用.22 03/08 13:17
5F：→ cocoon121:如果怕大分子量的太多 可用兩個膜(.45+.22)去tran 03/08 13:18
6F：→ bbiioo:恩~會試試的!謝謝 03/08 13:56