作者bbiioo (梅子)
看板Biotech
标题[求救] 小分子蛋白质
时间Sat Mar 7 11:07:50 2009
2-5kDa蛋白质进行N-端定序中的blotting要怎样才容易转上去
做了十几次都转不上去，跑16% tricine gel都有看见，但是就是转膜转不上去
是蛋白质量不够？还是损失掉了？转膜时间要多久才适当？
我方法是转膜时间0.5A转45分钟............迟迟无法上去= =
麻烦有经验的人提供一下方法罗!!
谢谢啦
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.130.38.65
※ 编辑: bbiioo 来自: 140.130.38.65 (03/07 15:53)
1F：推 alaric:转膜膜最好用0.22um的. 然後PAGE浓度提高, > 22%吧. 03/07 16:26
2F：→ bbiioo:0.22..不是就PVDF膜 有分孔径? 03/07 22:01
3F：推 DFS:有的 .45 & .22 03/08 00:15
4F：推 cocoon121:有 有分.45和.22 通常要看<20kda都用.22 03/08 13:17
5F：→ cocoon121:如果怕大分子量的太多 可用两个膜(.45+.22)去tran 03/08 13:18
6F：→ bbiioo:恩~会试试的!谢谢 03/08 13:56