作者willie0208 (我不要現在就出征....)
看板Biotech
標題[求救] 病毒RNA萃取
時間Wed Mar 4 14:12:51 2009
發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出
以方便板友幫您追蹤問題
----請將上列注意事項以 ctrl + k 刪除後開始編輯文章----
請教個位大大
有人抽過活病毒的RNA嗎??
我是用學姐留下的方法抽 但是一直抽不到
抽過的大大是否可以提供一下技巧呢??
以下是我抽的步驟
1.吸取150μL的病毒液(先稀釋過1000倍)
2.加入Trizol 1mL 混合均勻放置冰上五分鐘
3.加200μL的chloroform 混合均勻放置五分鐘
4.離心12000轉 4度C 10分鐘
5.取上清液
6.加入 1mL isopropanol放20度C半小時
7.離心12000轉 4度C 15分鐘
8.倒上清液後加入 1mL 75%酒精
9.離心12000轉 4度C 15分鐘
10.倒掉上清液拿去烘乾後加滅菌後2次水回溶
有問題請大家指教 謝謝 ^^
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 203.71.94.5
1F：推 andy731:這不就是普通total RNA的抽出步驟嗎?? 03/04 15:18
2F：→ andy731:病毒有養活嗎? 病毒量太低? 稀釋量太高? 03/04 15:20
3F：→ andy731:第一步驟稀釋量降低試試看吧.... 03/04 15:23
4F：推 porpoising:isopropanol沉澱是在冰上or -20 or -80,可以在此步驟加 03/06 06:40
5F：→ porpoising:glycogen增加RNA沉澱的量 03/06 06:40