作者willie0208 (我不要现在就出征....)
看板Biotech
标题[求救] 病毒RNA萃取
时间Wed Mar 4 14:12:51 2009
发问时请注意，若是要问实验相关的问题，请将实验的步骤、所用的条件大致列出
以方便板友帮您追踪问题
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请教个位大大
有人抽过活病毒的RNA吗??
我是用学姐留下的方法抽 但是一直抽不到
抽过的大大是否可以提供一下技巧呢??
以下是我抽的步骤
1.吸取150μL的病毒液(先稀释过1000倍)
2.加入Trizol 1mL 混合均匀放置冰上五分钟
3.加200μL的chloroform 混合均匀放置五分钟
4.离心12000转 4度C 10分钟
5.取上清液
6.加入 1mL isopropanol放20度C半小时
7.离心12000转 4度C 15分钟
8.倒上清液後加入 1mL 75%酒精
9.离心12000转 4度C 15分钟
10.倒掉上清液拿去烘乾後加灭菌後2次水回溶
有问题请大家指教 谢谢 ^^
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 203.71.94.5
1F：推 andy731:这不就是普通total RNA的抽出步骤吗?? 03/04 15:18
2F：→ andy731:病毒有养活吗? 病毒量太低? 稀释量太高? 03/04 15:20
3F：→ andy731:第一步骤稀释量降低试试看吧.... 03/04 15:23
4F：推 porpoising:isopropanol沉淀是在冰上or -20 or -80,可以在此步骤加 03/06 06:40
5F：→ porpoising:glycogen增加RNA沉淀的量 03/06 06:40