作者ararthur ()
看板Biotech
標題[討論] 存菌? 凍菌?
時間Thu Feb 26 19:57:25 2009
因為最近開始做細菌的實驗
但實驗室的背景並沒有太多養細菌的protocol
所以想請問一下
為什麼我們實驗室裡會有一些在常溫下存放
有裝著agar和菌的小管呢?
並且其年限已經不可考
我以為存菌必須加入15% glycerol 混勻後置入-80度的冰箱
但不曉得為什麼會有這種菌株的存放方式
所以想請教各位
另外也想問問 如果要從-80度裡取出之前存的菌回來養
應該怎麼樣解凍比較好
我現在用的方法是-20放置1 hr, 冰箱上層放置1 hr 下層放置1 hr
然後才加100ul 進入新的LB medium(15~20ml)
不過覺得長得很慢很慢
所以這個地方有沒有什麼改善的空間呢?
謝謝
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◆ From: 140.112.133.91
1F：推 conective:囧 我都直接全下到新的LB裡就好了 100會不會太少 02/26 20:08
2F：推 conective:用養菌管養約8ML左右 O/N通常就長得很好 02/26 20:12
3F：→ conective:看你的菌株是什麼條件吧？ 02/26 20:13
請問你是怎麼全下的? 有溶解嗎 或是直接挖冰進去呢??
4F：推 alaric:可以先劃到新的LB plate, 再從其中挑來養菌液. 02/26 20:37
5F：推 kirby0415:趕時間就會從凍菌取大概10ul到5ml LB中,O/N就長得很多了 02/26 21:32
但O/N 這樣應該就報表了 也不是最健康的時刻
那我後續的實驗是為了要測其對抗生素的耐受性
如此一來就沒有好結果了吧!?
6F：→ kirby0415:不趕時間可以塗盤再挑菌去轉小量 02/26 21:32
因為塗盤只能挑出某隻菌
但我的存菌管裡存的不只一種菌而已耶...
7F：推 sGoat:會有含agar的小管通常是購買或是寄送菌種的保存方式 02/27 00:04
8F：→ sGoat:作好要冰的菌液態氮冷凍後直接丟-80即可,菌沒那麼容易死 02/27 00:05
9F：→ sGoat:要取出使用,拿tip或牙簽劃一下冰塊不用解凍,直接塗盤挑單株 02/27 00:07
唔 同上 我沒辦法只挑單株
有沒有更好的方法呢??
還是謝謝各位^^
※ 編輯: ararthur 來自: 118.167.30.61 (02/27 01:34)
10F：推 milkpa:為什麼不挑單株？這種情況很少見 02/27 12:00