作者ararthur ()
看板Biotech
标题[讨论] 存菌? 冻菌?
时间Thu Feb 26 19:57:25 2009
因为最近开始做细菌的实验
但实验室的背景并没有太多养细菌的protocol
所以想请问一下
为什麽我们实验室里会有一些在常温下存放
有装着agar和菌的小管呢?
并且其年限已经不可考
我以为存菌必须加入15% glycerol 混匀後置入-80度的冰箱
但不晓得为什麽会有这种菌株的存放方式
所以想请教各位
另外也想问问 如果要从-80度里取出之前存的菌回来养
应该怎麽样解冻比较好
我现在用的方法是-20放置1 hr, 冰箱上层放置1 hr 下层放置1 hr
然後才加100ul 进入新的LB medium(15~20ml)
不过觉得长得很慢很慢
所以这个地方有没有什麽改善的空间呢?
谢谢
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◆ From: 140.112.133.91
1F：推 conective:囧 我都直接全下到新的LB里就好了 100会不会太少 02/26 20:08
2F：推 conective:用养菌管养约8ML左右 O/N通常就长得很好 02/26 20:12
3F：→ conective:看你的菌株是什麽条件吧？ 02/26 20:13
请问你是怎麽全下的? 有溶解吗 或是直接挖冰进去呢??
4F：推 alaric:可以先划到新的LB plate, 再从其中挑来养菌液. 02/26 20:37
5F：推 kirby0415:赶时间就会从冻菌取大概10ul到5ml LB中,O/N就长得很多了 02/26 21:32
但O/N 这样应该就报表了 也不是最健康的时刻
那我後续的实验是为了要测其对抗生素的耐受性
如此一来就没有好结果了吧!?
6F：→ kirby0415:不赶时间可以涂盘再挑菌去转小量 02/26 21:32
因为涂盘只能挑出某只菌
但我的存菌管里存的不只一种菌而已耶...
7F：推 sGoat:会有含agar的小管通常是购买或是寄送菌种的保存方式 02/27 00:04
8F：→ sGoat:作好要冰的菌液态氮冷冻後直接丢-80即可,菌没那麽容易死 02/27 00:05
9F：→ sGoat:要取出使用,拿tip或牙签划一下冰块不用解冻,直接涂盘挑单株 02/27 00:07
唔 同上 我没办法只挑单株
有没有更好的方法呢??
还是谢谢各位^^
※ 编辑: ararthur 来自: 118.167.30.61 (02/27 01:34)
10F：推 milkpa:为什麽不挑单株？这种情况很少见 02/27 12:00