作者paraheamly (涼爽的天氣 悠閒的心情)
看板Biotech
標題[求救] 跑2D的Rehydration buffer 有沉澱物是為什麼
時間Sat Jan 17 09:55:21 2009
最近因為在跑2D電泳，用一般的Rehydration buffer 去回溶sample，結果發現有沉澱物
原本以為是蛋白質沒有溶完全造成的，但結果發現如果拿原始的Rehydration buffer
去離心10000g 10mins 一樣會有沉澱物，想問各位大大這是甚麼原因造成的
配方是 7M Urea 4%CHAPS 2M Thiourea，是藥品的純度還是牌子有差，還是配法有什麼要
注意的嗎?
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◆ From: 140.109.55.234
1F：推 muchmoa:那應該只是tube或水裡的雜質，離心後不要吸到就好 01/17 11:04
2F：推 vancent:有加bromophenolblue嗎~加太多也會有沉澱物哦 01/17 18:11
3F：→ vancent:我學長說有可能會影響到一維~但影響不大 01/17 18:12
4F：推 pent:urea嗎？ 01/17 19:48
5F：→ paraheamly:沒加bromophenolblue 可是UREA的純度有差嗎? 99.5%的 01/17 22:14
6F：推 sunnyting:中高轉速 縱使只是均勻的懸浮物也會被你轉下來 01/18 02:13
7F：→ sunnyting:還有你的rehygration buffer怎麼不含IPG buffer? 01/18 02:13
8F：→ sunnyting:然後建議可以調高urea濃度 通常8~9M 可以提高蛋白質溶解 01/18 02:13
9F：→ sunnyting:發現打錯字 囧 rehydration 01/18 02:14
10F：推 piparing:Urea建議用純度高一點的 02/03 08:11