作者paraheamly (凉爽的天气 悠闲的心情)
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标题[求救] 跑2D的Rehydration buffer 有沉淀物是为什麽
时间Sat Jan 17 09:55:21 2009
最近因为在跑2D电泳,用一般的Rehydration buffer 去回溶sample,结果发现有沉淀物
原本以为是蛋白质没有溶完全造成的,但结果发现如果拿原始的Rehydration buffer
去离心10000g 10mins 一样会有沉淀物,想问各位大大这是甚麽原因造成的
配方是 7M Urea 4%CHAPS 2M Thiourea,是药品的纯度还是牌子有差,还是配法有什麽要
注意的吗?
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◆ From: 140.109.55.234
1F:推 muchmoa:那应该只是tube或水里的杂质,离心後不要吸到就好 01/17 11:04
2F:推 vancent:有加bromophenolblue吗~加太多也会有沉淀物哦 01/17 18:11
3F:→ vancent:我学长说有可能会影响到一维~但影响不大 01/17 18:12
4F:推 pent:urea吗? 01/17 19:48
5F:→ paraheamly:没加bromophenolblue 可是UREA的纯度有差吗? 99.5%的 01/17 22:14
6F:推 sunnyting:中高转速 纵使只是均匀的悬浮物也会被你转下来 01/18 02:13
7F:→ sunnyting:还有你的rehygration buffer怎麽不含IPG buffer? 01/18 02:13
8F:→ sunnyting:然後建议可以调高urea浓度 通常8~9M 可以提高蛋白质溶解 01/18 02:13
9F:→ sunnyting:发现打错字 囧 rehydration 01/18 02:14
10F:推 piparing:Urea建议用纯度高一点的 02/03 08:11