作者aflyingfish (飛魚)
看板Biotech
標題[求救] 跑SDS-PAGE 時會暈開
時間Tue Jan 13 18:25:06 2009
想請問板上的前輩有沒有類似的經驗
就是我在跑SDS-PAGE時，sample沒有辦法集中成一條線
跑過stacking gel之後 會糊開來
我第一次發現這問題時，因為很急，我直接把我自己現配的buffer等等都重配
結果仍然出現一樣的問題，我的gel 配法都一直follow實驗室同學教我的
請問有沒有前輩以前也有類似的經驗，有辦法幫我預測看看是什麼地方出問題嗎
PS: marker可以跑開
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◆ From: 192.192.93.133
1F：推 aceliang:acrylamide的濃度對嘛？ 01/13 18:43
2F：推 tsubasawolfy:marker可以跑開 應該是smpale的問題吧? loading dye 01/13 18:49
3F：→ tsubasawolfy:比例不對0.0? 01/13 18:49
4F：推 leoblack:你是指跑到stacking gel時,你的dye會糊成一片嗎?! 01/13 18:55
5F：→ leoblack:不過印象中,結果好像不會有很大的影響~band還是很sharp 01/13 18:56
6F：推 sunnyting:你有沒有你跑完染色後的照片? 01/13 18:58
7F：推 J0HAN:有檢查 pH 對不對嗎？Sample 是用什麼條件煮的？ 01/13 20:40
8F：推 peggie0903:sample有經過處理嗎？硫酸銨沈澱之類的？ 01/13 23:28
9F：推 chiehgriffin:換一台power supply 01/13 23:53
10F：推 untilnow:你有完整跑完嗎？ 有時候跑完的話,會再壓回一條線喔 01/14 00:03
11F：推 chvkimo:有也有遇過 在stacking的位置就糊糊的 但是到separating 01/14 22:36
12F：→ chvkimo:時,就沒有那麼嚴重,最後western測actin 也不至於造成很粗 01/14 22:37
13F：→ chvkimo:的band,也像你一樣,很多buffer都重配了還是一樣,後來有使 01/14 22:38
14F：→ chvkimo:別人家的loading buffer,似乎就比較改善了,所以猜測可能 01/14 22:39
15F：→ chvkimo:放太久,pH值已經不對了,你參考看看吧 01/14 22:41
16F：→ chvkimo:但是同時我同實驗室的同學 跑的時候就上樓上推文講的一樣 01/14 22:41
17F：→ chvkimo:跑到後來就變成一直線,明明我跟他就用同一種loading buffe 01/14 22:42
18F：→ chvkimo:結果卻出現不一樣,真是見X了 01/14 22:42
19F：推 sunnyting:原波是忙實驗忙到忘了做回應嗎? 囧 害我好好奇說~ 01/15 15:57
20F：推 cutebetty:running buffer的pH值可能會有關係..... 01/21 10:55