作者aflyingfish (飞鱼)
看板Biotech
标题[求救] 跑SDS-PAGE 时会晕开
时间Tue Jan 13 18:25:06 2009
想请问板上的前辈有没有类似的经验
就是我在跑SDS-PAGE时，sample没有办法集中成一条线
跑过stacking gel之後 会糊开来
我第一次发现这问题时，因为很急，我直接把我自己现配的buffer等等都重配
结果仍然出现一样的问题，我的gel 配法都一直follow实验室同学教我的
请问有没有前辈以前也有类似的经验，有办法帮我预测看看是什麽地方出问题吗
PS: marker可以跑开
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◆ From: 192.192.93.133
1F：推 aceliang:acrylamide的浓度对嘛？ 01/13 18:43
2F：推 tsubasawolfy:marker可以跑开 应该是smpale的问题吧? loading dye 01/13 18:49
3F：→ tsubasawolfy:比例不对0.0? 01/13 18:49
4F：推 leoblack:你是指跑到stacking gel时,你的dye会糊成一片吗?! 01/13 18:55
5F：→ leoblack:不过印象中,结果好像不会有很大的影响~band还是很sharp 01/13 18:56
6F：推 sunnyting:你有没有你跑完染色後的照片? 01/13 18:58
7F：推 J0HAN:有检查 pH 对不对吗？Sample 是用什麽条件煮的？ 01/13 20:40
8F：推 peggie0903:sample有经过处理吗？硫酸铵沈淀之类的？ 01/13 23:28
9F：推 chiehgriffin:换一台power supply 01/13 23:53
10F：推 untilnow:你有完整跑完吗？ 有时候跑完的话,会再压回一条线喔 01/14 00:03
11F：推 chvkimo:有也有遇过 在stacking的位置就糊糊的 但是到separating 01/14 22:36
12F：→ chvkimo:时,就没有那麽严重,最後western测actin 也不至於造成很粗 01/14 22:37
13F：→ chvkimo:的band,也像你一样,很多buffer都重配了还是一样,後来有使 01/14 22:38
14F：→ chvkimo:别人家的loading buffer,似乎就比较改善了,所以猜测可能 01/14 22:39
15F：→ chvkimo:放太久,pH值已经不对了,你参考看看吧 01/14 22:41
16F：→ chvkimo:但是同时我同实验室的同学 跑的时候就上楼上推文讲的一样 01/14 22:41
17F：→ chvkimo:跑到後来就变成一直线,明明我跟他就用同一种loading buffe 01/14 22:42
18F：→ chvkimo:结果却出现不一样,真是见X了 01/14 22:42
19F：推 sunnyting:原波是忙实验忙到忘了做回应吗? 囧 害我好好奇说~ 01/15 15:57
20F：推 cutebetty:running buffer的pH值可能会有关系..... 01/21 10:55