作者epoch (泗水亭長作天子)
看板Biotech
標題[轉錄][問題] 如何解決PCR多一個A的問題???
時間Thu Jan 1 20:55:34 2009
※ [本文轉錄自 Bioindustry 看板]
作者: s731 (好色小雄獅) 看板: Bioindustry
標題: [問題] 如何解決PCR多一個A的問題???
時間: Wed Dec 31 13:02:56 2008
我想問一下個問大大
我在做 PCR 時
總是會在一段有12個A的部份
多做出一個A來,變成13個A
我想請問一下
有沒有什麼方法可以改善
我目前是用 pfu + taq
pfu : taq = 1 : 16 的方式來跑PCR的
請各位大大提供我意見吧^^
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◆ From: 163.13.116.186
1F：推 kinray:應該到BIOTECH版問看看 12/31 16:33
2F：→ egro:用不會加A的酵素~~你用的是TA克隆的~~ 12/31 17:55
3F：→ egro:我耍笨了 沒看清楚~~~多一個 我就不知道怎麼解決了 sorry 12/31 17:56
4F：推 heie:可以先用pfu做完反應後 再加入Taq及dATP反應30分鐘 即可 12/31 17:56
5F：→ heie:我也耍笨了~~~ 12/31 17:58
6F：→ qumai:Taq本來就會多一個a吧 你不要的話就只用pfu就好了阿 12/31 19:16
7F：推 afunafun:會不會是定序訊號pick太亂導致 建議用肉眼看一下圖表 01/01 18:12
8F：→ afunafun:常常有時訊號會干擾電腦的判讀 所需要用人工輔助 01/01 18:13
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◆ From: 118.168.36.223
9F：推 s731:我確定是多一A,看過圖也確定是多一個Orz 01/05 17:23