作者epoch (泗水亭长作天子)
看板Biotech
标题[转录][问题] 如何解决PCR多一个A的问题???
时间Thu Jan 1 20:55:34 2009
※ [本文转录自 Bioindustry 看板]
作者: s731 (好色小雄狮) 看板: Bioindustry
标题: [问题] 如何解决PCR多一个A的问题???
时间: Wed Dec 31 13:02:56 2008
我想问一下个问大大
我在做 PCR 时
总是会在一段有12个A的部份
多做出一个A来,变成13个A
我想请问一下
有没有什麽方法可以改善
我目前是用 pfu + taq
pfu : taq = 1 : 16 的方式来跑PCR的
请各位大大提供我意见吧^^
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◆ From: 163.13.116.186
1F：推 kinray:应该到BIOTECH版问看看 12/31 16:33
2F：→ egro:用不会加A的酵素~~你用的是TA克隆的~~ 12/31 17:55
3F：→ egro:我耍笨了 没看清楚~~~多一个 我就不知道怎麽解决了 sorry 12/31 17:56
4F：推 heie:可以先用pfu做完反应後 再加入Taq及dATP反应30分钟 即可 12/31 17:56
5F：→ heie:我也耍笨了~~~ 12/31 17:58
6F：→ qumai:Taq本来就会多一个a吧 你不要的话就只用pfu就好了阿 12/31 19:16
7F：推 afunafun:会不会是定序讯号pick太乱导致 建议用肉眼看一下图表 01/01 18:12
8F：→ afunafun:常常有时讯号会干扰电脑的判读 所需要用人工辅助 01/01 18:13
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◆ From: 118.168.36.223
9F：推 s731:我确定是多一A,看过图也确定是多一个Orz 01/05 17:23