作者infinityrain (我是可憐蟲>_<...)
看板Biotech
標題Re: [求救] DNA定序的廠商
時間Fri Dec 12 23:17:29 2008
借個標題問一下,
我想板上應該有人有做過fusion protein,
而fusion protein的核酸長度應該也大多不算短,
像我現在在做的總長大約就有1900bp.
但有個問題是,我請廠商(源資)幫我從兩頭定序,
回來的結果頭尾頂多只有700bp~800bp的可信,
雖然定序的的訊號有到900bp啦,但太後面的peak看來就不可靠,
而且,就算我頭尾都定,這兩端的信號也沒overlap,
中間的base就不知到底有沒有對.
因此我想問各位有做過長片段fusion protein的,
你們在clone完後應該也會送定序吧?那有什麼方法可以確認中段base的正確性呢?
是要另外再設計primer讓廠商可以從中間定序?
還是說有廠商可以提供長片段的核酸定序服務?
還是,只看頭尾,中間就不理他了!?
(不過我想應該不會是這個吧>_<)
另外再問一下,polymerase
(如Taq)在進行PCR時,
是否會有愈尾端錯誤愈多的情形,還是說錯誤的發生是很平均分布的呢?
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◆ From: 61.64.79.241
1F：推 hek:多訂一條primer去定序中間的部分. 12/12 23:25
2F：推 owl628:多訂一條primer請廠商定中間的序列 12/12 23:29
3F：推 a64toto:多訂兩條primer去定序中間的部分 12/13 11:18
4F：推 witchs:做fusion protein...最好用pfu 12/13 14:22