※ 引述《tsubasawolfy (悠久の翼)》之銘言： : ※ 引述《feshu (小飛鼠)》之銘言： : : 請問各位大大有培養過前列腺癌細胞LNCaP的經驗嗎? : : 能否告訴我培養這株細胞的方式，因為我沒有經驗 : : 所以最近細胞的狀況很不好，想要請教各位大大 : : 謝謝 : 這株細胞跟他的兄弟PC3比起來從小嬌生慣養 : subculture時 打散細胞不能太粗魯 要小心的沖吸沖吸(PC3拿去vortex照樣頭好壯壯) : LNCaP因為接近正常細胞所以會難打散 耐心點慢慢打XD : 細胞不能養太滿 大概8分滿就該分盤 因為太滿老細胞多 分盤後就會看到奇形怪狀的 : 細胞出現 (基因也變的不穩定 應該說可能跟原來的LNCaP會有所不同) : 剛解凍的LNCaP大概要兩個兩三代後才會甦醒(會發現她突然長的很快XD) LNCaP屬於前列腺癌前期細胞株 細胞特性屬半懸浮性的 不管在活化 繼代或是加藥處理都需要小心 換培養基的時候建議要回收懸浮的細胞 因為它不是死掉才浮起來的 尤其加藥處理特別要小心 我會建議用flask養 減少污染的機會 誠如上篇回文所言 活化的過程非常漫長 基因表現的話建議你可以看AR PSA這兩個基因 都是前列腺癌細胞會表現的基因 再來就是培養基的問題 一般在ATCC上看到的都是使用RPMI1640 這種培養基廣泛的使用在各式的細胞株 但是拿它來培養LNCaP時 需要外加glucose sodium bicarbonate(這是一定的啦) HEPES 還有一個叫做SODIUM PYRUVATE的一定要加 我試過有添加跟沒有添加的 生長上是有差異的 這些是我養的經驗 有問題寫信來問我吧 如果我幫的上忙的話^_^ --

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