作者ericial (就让我像个笨蛋一样吧)
看板Biotech
标题Re: [求救] 关於前列腺癌细胞LNCaP
时间Fri Dec 12 01:54:35 2008
※ 引述《tsubasawolfy (悠久の翼)》之铭言:
: ※ 引述《feshu (小飞鼠)》之铭言:
: : 请问各位大大有培养过前列腺癌细胞LNCaP的经验吗?
: : 能否告诉我培养这株细胞的方式,因为我没有经验
: : 所以最近细胞的状况很不好,想要请教各位大大
: : 谢谢
: 这株细胞跟他的兄弟PC3比起来从小娇生惯养
: subculture时 打散细胞不能太粗鲁 要小心的冲吸冲吸(PC3拿去vortex照样头好壮壮)
: LNCaP因为接近正常细胞所以会难打散 耐心点慢慢打XD
: 细胞不能养太满 大概8分满就该分盘 因为太满老细胞多 分盘後就会看到奇形怪状的
: 细胞出现 (基因也变的不稳定 应该说可能跟原来的LNCaP会有所不同)
: 刚解冻的LNCaP大概要两个两三代後才会苏醒(会发现她突然长的很快XD)
LNCaP属於前列腺癌前期细胞株
细胞特性属半悬浮性的
不管在活化 继代或是加药处理都需要小心
换培养基的时候建议要回收悬浮的细胞
因为它不是死掉才浮起来的
尤其加药处理特别要小心
我会建议用flask养
减少污染的机会
诚如上篇回文所言 活化的过程非常漫长
基因表现的话建议你可以看AR PSA这两个基因
都是前列腺癌细胞会表现的基因
再来就是培养基的问题
一般在ATCC上看到的都是使用RPMI1640
这种培养基广泛的使用在各式的细胞株
但是拿它来培养LNCaP时
需要外加glucose sodium bicarbonate(这是一定的啦) HEPES
还有一个叫做SODIUM PYRUVATE的一定要加
我试过有添加跟没有添加的
生长上是有差异的
这些是我养的经验
有问题写信来问我吧
如果我帮的上忙的话^_^
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