作者bbiioo (梅子)
看板Biotech
標題Re: [求救]作 RT-PCR
時間Tue Dec 9 10:25:08 2008
※ 引述《sharkcell (我好想念妳，Chic)》之銘言：
: 前文吃光光...
: 做RNA的實驗其實沒有原po想的那麼難
: 只要做好以下幾點就好
: 1.DEPC水處理過所有的tip跟eppendorf(要泡著去滅菌)
: PS:DEPC有毒，可以多滅幾次以去除DEPC多一點
這有作到!
我是離心管、研砵(我的Sample是真菌)有泡DEPC水和滅菌兩次
研砵是直接再烘箱200度烘烤
每次烘的時候都會有燒焦味 很怕它真的燒了!!
tip跟eppendorf則是只有滅兩次
: 2.操作時戴手套跟口罩，最好不要說話
: (最好每次都用新的)
恩...之前常在抽RNA時 消耗好多的手套..
唉 感覺有點浪費 可是還是得這樣呀
: 3.bench儘可能乾淨，雜物不要太多
: 能的話可以用一種藥劑(忘了名稱XD)擦拭桌面
: 至於進不進laminar flow裡操作我覺得就沒有很必要了
: 畢竟RNase是無所不在的
: RNase也不是um孔徑可以過濾掉的東西
: 操作者"愛乾淨"的習慣才是主因
: 能的話在實驗室角落操作就可以了
: 畢竟角落處比較少有人經過也就比較不會有隨風揚起的RNase了
: 如果實驗是要長期操作RNA的話
: 最好還是set up一塊專門操作的區域
我們是有一塊小區域是作RNA的
看來在laminar flow裡不是好方法呀!!
: 畢竟清理出一個RNA操作區還蠻麻煩的
: 以上，個人淺見，歡迎討論
恩..感謝你的建議
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◆ From: 140.130.38.65
1F：推 hidehou:手套可以留著染膠時用 12/09 16:01
2F：→ bbiioo:恩..我是會留著 不過從抽到作RTPCR要用好幾雙 12/09 16:13
3F：→ bbiioo:再問一下!有人作一般DNA實驗(如 限制酶)會跑到無菌操作台嗎 12/10 09:27
4F：推 sGoat:不會,做細菌或是細胞,組織培養的才會到操作台 12/10 09:28
5F：→ bbiioo:恩..會這樣問 是因為之前也隔壁實驗室被DNase污染 12/10 09:51
6F：→ bbiioo:結果他們就在無菌操作台作實驗去了 聽說本來作不出來 12/10 09:52
7F：→ bbiioo:就作出來了 12/10 09:52
8F：推 sharkcell:我覺得是心理作用居多~想不出laminar flow有什麼幫助 12/10 10:44
9F：推 sGoat:應該是手腳不乾淨在flow裡面也沾不到啥去污染的關係吧 12/10 14:56
10F：→ sGoat:個人習慣好,再亂的地方也做的出來(當然是亂在可接受範圍內 12/10 14:57
11F：→ bbiioo:恩..所以 主要還是 自己手要乾淨 桌子要乾淨比較重要!!! 12/10 21:59