作者reisyuu (reisyuu)
看板Biotech
標題[求救] MTT assay (SH-SY5Y cell line)
時間Fri Nov 28 14:47:20 2008
第一次使用2*10^5 cells/ml的SH-SY5Y
seed cell四小時後加入sample
結果control組的細胞全都死掉了(呈黃色)
考慮過是不是因為細胞數過多的關係導致control組細胞死亡
所以又分別以1*10^5, 1*10^4 cells/ml不同細胞數做測試
但是control組依然呈現黃色
後來思考過會不會是seeding時間不夠長導致細胞狀況不好
因此延長了seeding cell的時間(8hr)
細胞數為5*10^4 cells/ml
還是同樣結果
我用別的細胞做MTT都不會發生這樣的情形
想請問做SH-SY5Y cell的MTT assay時有哪裡需要特別注意的???
謝謝
基本實驗流程為
1. seeding cell(4-12hr) 含2%血清的medium
2. 加入sample培養12hr 同樣含2%血清
3. 加MTT reagent四小時之後測吸光值
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.121.155.162
1F：推 sharkcell:2%血清培養會不會太低了...還有你種在幾公分dish上？ 11/28 14:54
2F：→ reisyuu:抱歉~忘了註明...96 WELL上 11/28 15:21
3F：→ reisyuu:那麼請問一般都是用幾%血清呢? 11/28 15:22
4F：→ reisyuu:用2%是考量到血清也會影響細胞生長所以才用比較低 11/28 15:23
5F：推 bigcat24:96well內一般建議總細胞數應該是 2~5*10**4哩 11/28 16:06
6F：推 malakaki:MTT做完,用啥溶結晶 ? 11/29 22:05
7F：→ malakaki:我做過SH-SY5Y,很容易的 11/29 22:05
8F：推 a910298: seeding時間我都放24小時候才家MTT到96well,MTT建議包鋁 09/14 17:04