作者reisyuu (reisyuu)
看板Biotech
标题[求救] MTT assay (SH-SY5Y cell line)
时间Fri Nov 28 14:47:20 2008
第一次使用2*10^5 cells/ml的SH-SY5Y
seed cell四小时後加入sample
结果control组的细胞全都死掉了(呈黄色)
考虑过是不是因为细胞数过多的关系导致control组细胞死亡
所以又分别以1*10^5, 1*10^4 cells/ml不同细胞数做测试
但是control组依然呈现黄色
後来思考过会不会是seeding时间不够长导致细胞状况不好
因此延长了seeding cell的时间(8hr)
细胞数为5*10^4 cells/ml
还是同样结果
我用别的细胞做MTT都不会发生这样的情形
想请问做SH-SY5Y cell的MTT assay时有哪里需要特别注意的???
谢谢
基本实验流程为
1. seeding cell(4-12hr) 含2%血清的medium
2. 加入sample培养12hr 同样含2%血清
3. 加MTT reagent四小时之後测吸光值
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◆ From: 140.121.155.162
1F：推 sharkcell:2%血清培养会不会太低了...还有你种在几公分dish上？ 11/28 14:54
2F：→ reisyuu:抱歉~忘了注明...96 WELL上 11/28 15:21
3F：→ reisyuu:那麽请问一般都是用几%血清呢? 11/28 15:22
4F：→ reisyuu:用2%是考量到血清也会影响细胞生长所以才用比较低 11/28 15:23
5F：推 bigcat24:96well内一般建议总细胞数应该是 2~5*10**4哩 11/28 16:06
6F：推 malakaki:MTT做完,用啥溶结晶 ? 11/29 22:05
7F：→ malakaki:我做过SH-SY5Y,很容易的 11/29 22:05
8F：推 a910298: seeding时间我都放24小时候才家MTT到96well,MTT建议包铝 09/14 17:04