作者yashi (我要天天快樂快樂)
看板Biotech
標題[求救] 請問有人做過nanog的western blot嗎？
時間Wed Nov 26 18:42:48 2008
最近開始try western blot
目的是要看幹細胞是否具有分化的潛能
這是我的結果
http://www.wretch.cc/album/album.php?id=yashihuang&book=17
密碼是ptt
左右二邊分別是marker
而最右邊黃色圈圈圈起來的是actin
我用的系統比較特別
可以同時染兩個有興趣的蛋白質
用不用的二抗 不同的波長激發
紅色的是actin 綠色的是nanog
我每個lane只是濃度不同
所以如果有nanog的地方就要有actin
可是就如照片上的
有一團綠綠的東西在中間…
我不知道倒底出了什麼問題了
我跑電泳的條件是100V 1hr25min
transfer 200mA 2hr
blocking 4℃ overnight
一抗 2hr
TBST 洗三次 每次5MIN
二抗3hr 避光
TBST 洗三次 每次5min
不知道有沒有高手可以告訴我發生了什麼事…
我都快被搞瘋了
先說一聲謝謝了…
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.23.86
※ 編輯: yashi 來自: 140.112.23.86 (11/26 18:43)
1F：推 gg258:我很想問為何右邊的marker這麼醜，另外就是你repeat幾次？通 11/28 21:54
2F：→ gg258:常實驗出現無法解釋的現象是常有的事(但是通常第二次就ok了) 11/28 21:56
3F：→ yashi:我才做一次…右邊的marker 我也不知道怎麼了…以前不會哎> < 11/28 22:36