作者yashi (我要天天快乐快乐)
看板Biotech
标题[求救] 请问有人做过nanog的western blot吗？
时间Wed Nov 26 18:42:48 2008
最近开始try western blot
目的是要看干细胞是否具有分化的潜能
这是我的结果
http://www.wretch.cc/album/album.php?id=yashihuang&book=17
密码是ptt
左右二边分别是marker
而最右边黄色圈圈圈起来的是actin
我用的系统比较特别
可以同时染两个有兴趣的蛋白质
用不用的二抗 不同的波长激发
红色的是actin 绿色的是nanog
我每个lane只是浓度不同
所以如果有nanog的地方就要有actin
可是就如照片上的
有一团绿绿的东西在中间…
我不知道倒底出了什麽问题了
我跑电泳的条件是100V 1hr25min
transfer 200mA 2hr
blocking 4℃ overnight
一抗 2hr
TBST 洗三次 每次5MIN
二抗3hr 避光
TBST 洗三次 每次5min
不知道有没有高手可以告诉我发生了什麽事…
我都快被搞疯了
先说一声谢谢了…
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.23.86
※ 编辑: yashi 来自: 140.112.23.86 (11/26 18:43)
1F：推 gg258:我很想问为何右边的marker这麽丑，另外就是你repeat几次？通 11/28 21:54
2F：→ gg258:常实验出现无法解释的现象是常有的事(但是通常第二次就ok了) 11/28 21:56
3F：→ yashi:我才做一次…右边的marker 我也不知道怎麽了…以前不会哎> < 11/28 22:36