作者pwl (蓄勢待發)
看板Biotech
標題[求救] HIS tag蛋白質純化
時間Wed Nov 26 11:46:13 2008
我針對一個his tag蛋白質進行純化
但是專一性不夠高
我要用來提供廠商當bait純化抗體
所以需要非常純的蛋白質
請問我現在純化出來的蛋白質可以再拿來通column嗎？
-這些蛋白質是溶在elution buffer裡面（high imidazole）
我想到兩個方法
1.將純化出來的蛋白質做透析換buffer
2.重新作可怕的破菌
然後跟別人借機器用不同濃度的imidazole將蛋白質elute出來
不知道還有沒有其他可以提高專一性的方法？？？
--
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.109.40.71
1F：→ ROKEE:試其他column 11/26 12:14
2F：推 nzj:可做gel filtration or ion exchange 要多試條件 要看運氣 11/26 16:56
3F：推 youngssq:imidazole拉梯度或是再使用另一種純化方法 11/28 17:26