作者pwl (蓄势待发)
看板Biotech
标题[求救] HIS tag蛋白质纯化
时间Wed Nov 26 11:46:13 2008
我针对一个his tag蛋白质进行纯化
但是专一性不够高
我要用来提供厂商当bait纯化抗体
所以需要非常纯的蛋白质
请问我现在纯化出来的蛋白质可以再拿来通column吗？
-这些蛋白质是溶在elution buffer里面（high imidazole）
我想到两个方法
1.将纯化出来的蛋白质做透析换buffer
2.重新作可怕的破菌
然後跟别人借机器用不同浓度的imidazole将蛋白质elute出来
不知道还有没有其他可以提高专一性的方法？？？
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.109.40.71
1F：→ ROKEE:试其他column 11/26 12:14
2F：推 nzj:可做gel filtration or ion exchange 要多试条件 要看运气 11/26 16:56
3F：推 youngssq:imidazole拉梯度或是再使用另一种纯化方法 11/28 17:26