作者mournermind (阿矇)
看板Biotech
標題[求救] 關於western blotting用AP呈色的問題
時間Tue Nov 25 10:02:57 2008
最近在做western blotting時老是碰到一個棘手的問題:就是當我的PVDF膜
在buffer中呈色時看起來我要的band是很分明的,但是一但離開buffer
先泡入一次水中稍微泡一下去掉呈色buffer,再放到衛生紙上晾乾時
隨著PVDF膜越來越乾,我膜上band本身呈色的部分卻會像是消失ㄧ樣
再一個完整的呈色部份像是出現蜂窩一樣沒呈色到的白點
我用了不同抗體也是會出現一樣的狀況
我的BCIP NBT都是現配的 我的呈色時間大概是20~30分鐘
有哪位板大也是有過相同情況的媽?
我以前沒有出現這狀況的... 是因為奶粉已經結塊的關係嗎...
救命 > <
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◆ From: 140.113.173.161
1F：推 leoblack:我用結塊的奶粉泡1抗,4度搖o/n,會長菌變綠色耶~ 11/25 22:49
2F：推 Nikio:沒錯～綠色牛奶！還很臭！ 11/26 01:14
3F：推 huhu126:PVDF乾燥後顏色會退,所以可以試著呈色時間久一點再stop看 12/06 18:21
4F：→ huhu126:看會不會好一點,第二段看不太懂意思,不過有白點會不會是 12/06 18:22
5F：→ huhu126:transfer時有氣泡之類的,不然就是blocking或一抗有東西沉 12/06 18:24
6F：→ huhu126:澱在膜上卡住了吧 12/06 18:25
7F：→ mournermind:謝謝您我再試試看^^!! 12/09 21:12
8F：推 vvv33328: 想問下，我最近在採購NBT/BCIP想問有推薦的廠商嗎TT 01/06 14:59