作者mournermind (阿蒙)
看板Biotech
标题[求救] 关於western blotting用AP呈色的问题
时间Tue Nov 25 10:02:57 2008
最近在做western blotting时老是碰到一个棘手的问题:就是当我的PVDF膜
在buffer中呈色时看起来我要的band是很分明的,但是一但离开buffer
先泡入一次水中稍微泡一下去掉呈色buffer,再放到卫生纸上晾乾时
随着PVDF膜越来越乾,我膜上band本身呈色的部分却会像是消失ㄧ样
再一个完整的呈色部份像是出现蜂窝一样没呈色到的白点
我用了不同抗体也是会出现一样的状况
我的BCIP NBT都是现配的 我的呈色时间大概是20~30分钟
有哪位板大也是有过相同情况的妈?
我以前没有出现这状况的... 是因为奶粉已经结块的关系吗...
救命 > <
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◆ From: 140.113.173.161
1F：推 leoblack:我用结块的奶粉泡1抗,4度摇o/n,会长菌变绿色耶~ 11/25 22:49
2F：推 Nikio:没错～绿色牛奶！还很臭！ 11/26 01:14
3F：推 huhu126:PVDF乾燥後颜色会退,所以可以试着呈色时间久一点再stop看 12/06 18:21
4F：→ huhu126:看会不会好一点,第二段看不太懂意思,不过有白点会不会是 12/06 18:22
5F：→ huhu126:transfer时有气泡之类的,不然就是blocking或一抗有东西沉 12/06 18:24
6F：→ huhu126:淀在膜上卡住了吧 12/06 18:25
7F：→ mournermind:谢谢您我再试试看^^!! 12/09 21:12
8F：推 vvv33328: 想问下，我最近在采购NBT/BCIP想问有推荐的厂商吗TT 01/06 14:59