作者fishchan (罵人直爽)
看板Biotech
標題[求救] SW480染PI
時間Fri Nov 21 03:53:20 2008
我用SW480(colon cancer)加入藥物作用24hr
染pi上flow看DNA 2N 4N 的變化
想看藥物會不會影響細胞周期的變化
可是跑出的FLOW圖 FL2-W FL2-A dot plot 卻很詭異
FL2-A除了在2N 4N 的地方有明顯的細胞群
在4N以上還多了一大群細胞
(而且FL2-W顯示這些都是單一顆細胞 而非細胞黏在一起)
用同樣的做法染U937 看到的FL2-W FL2-A dot plot 就很正常
我染PI的方法如下
收細胞
PBS wash 一次
離心1000rpm 去除PBS
加入70% 酒精固定 放冰上30MINS
離心1000rpm 去除酒精
PBS洗去剩餘酒精 離心去除PBS
加入PI染劑
過濾上機
想問一下 colon cancer 染pi 有哪些步驟要修正阿
還有 有CANCER CELL 在單顆細胞會出現大於4n(甚至到8n)的情形嗎?
發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出
以方便板友幫您追蹤問題
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◆ From: 192.192.93.165
1F：推 cuto:我做過A549(lung cancer)染PI看cell cycle 11/24 00:37
2F：→ cuto:4N之上確實也有出現一些訊號(單一細胞)~不過不是很多 11/24 00:38
3F：→ cuto:沒有甚麼幫助~哇哈哈! 提供參考囉~希望有高手可以解答>"< 11/24 00:40
4F：推 malakaki:碎片? 11/26 03:21