作者fishchan (骂人直爽)
看板Biotech
标题[求救] SW480染PI
时间Fri Nov 21 03:53:20 2008
我用SW480(colon cancer)加入药物作用24hr
染pi上flow看DNA 2N 4N 的变化
想看药物会不会影响细胞周期的变化
可是跑出的FLOW图 FL2-W FL2-A dot plot 却很诡异
FL2-A除了在2N 4N 的地方有明显的细胞群
在4N以上还多了一大群细胞
(而且FL2-W显示这些都是单一颗细胞 而非细胞黏在一起)
用同样的做法染U937 看到的FL2-W FL2-A dot plot 就很正常
我染PI的方法如下
收细胞
PBS wash 一次
离心1000rpm 去除PBS
加入70% 酒精固定 放冰上30MINS
离心1000rpm 去除酒精
PBS洗去剩余酒精 离心去除PBS
加入PI染剂
过滤上机
想问一下 colon cancer 染pi 有哪些步骤要修正阿
还有 有CANCER CELL 在单颗细胞会出现大於4n(甚至到8n)的情形吗?
发问时请注意，若是要问实验相关的问题，请将实验的步骤、所用的条件大致列出
以方便板友帮您追踪问题
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 192.192.93.165
1F：推 cuto:我做过A549(lung cancer)染PI看cell cycle 11/24 00:37
2F：→ cuto:4N之上确实也有出现一些讯号(单一细胞)~不过不是很多 11/24 00:38
3F：→ cuto:没有甚麽帮助~哇哈哈! 提供参考罗~希望有高手可以解答>"< 11/24 00:40
4F：推 malakaki:碎片? 11/26 03:21