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我最近都在作果蠅的polytene,之後要染色去拍confocal。 可是不管我怎麼壓片,染色體就是在核裡不出來, 要不然就是出來後,染色體卻碎掉了...orz 不知道是不是因為這樣,所以抗體染色結果都不均勻。 有的地方超亮,有的地方卻很暗。 我壓片的方法是: 1.把唾腺取出後放到載玻片,以Triton-X solution作用幾分鐘,再丟到醋酸中。 2.接著輕放上蓋玻片,左手食指母指定住蓋玻片,以鑷子另一頭,輕敲蓋玻片。 3.一樣用鑷子另一頭(鈍端),橫向用力刮蓋玻片。 p.s我不知道是不是這個步驟有錯,染色體容易碎掉!? 後來也試過用拇指直接按,結果染色體完全沒出來.. 4.接著就拿去顯微鏡,先觀察壓的成果。 5.若有水在流動,用手掌下半部,再用力下壓,壓到顯微鏡下沒有水流。 p.s不過似乎有時候壓到水都沒了...乾掉!?=口= 6.然後丟到液態N2幾秒鐘,存放methanol中,待染色用。 這個實驗....殺了上百條的larve了....取唾腺的技巧進步很多, 但壓片完全就是慘烈...老師說至少要壓到70%以上染色體都出核,才算及格... 求壓片高手,救救我啊~~~~有沒有什麼撇步可以壓的漂亮的????>"< ----請將上列注意事項以 ctrl + k 刪除後開始編輯文章---- --



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