作者ricky31 (榤)
看板Biotech
標題[求救] 萃取protein的問題
時間Thu Nov 20 18:24:32 2008
之前萃取蛋白是加入PBS刮下來的
可是老師覺得
用trypsin打下來會比較好
測出來的濃度
的確
比用加入PBS刮下來的濃度高太多
但是
trypsin本身就是一種蛋白
這樣子的作法
不會影響細胞蛋白嗎?
老師覺得不會
但是
因為跟先前用PBS刮下來測出的濃度差太多了
(用PBS的作法,濃度大約在200~300ug/ml，用trypsin的作法,濃度在800~1400ug/ml)
所以我還是很懷疑用trypsin萃蛋白的作法>"<
有人可以幫我解答嗎?
謝謝大家~
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.120.130.200
1F：推 blence:我是討厭trypsin用於收protein的,你考慮同樣ug做WB給老師看 11/20 18:55
2F：推 vancent:如果沒有要做和ATTACHMENT相關的PROTEIN應該比較沒差 11/20 19:35
3F：→ vancent:可是我不管PROTEIN拿來做什麼實驗~都是採用括的 11/20 19:36
4F：→ ricky31:我之前也用刮的,但是老師硬是要用trypsin打下來/m\ 11/20 19:40
5F：推 quatre2323:我做WB，都是用RIPA，再刮下來，不建議用trypsin 11/20 21:15
6F：推 zoom8080:buffer都還要加protease inhibitor了 trypsin再加進去.. 11/23 01:23
7F：→ zoom8080:根本意背道而馳 11/23 01:23