作者ricky31 (榤)
看板Biotech
标题[求救] 萃取protein的问题
时间Thu Nov 20 18:24:32 2008
之前萃取蛋白是加入PBS刮下来的
可是老师觉得
用trypsin打下来会比较好
测出来的浓度
的确
比用加入PBS刮下来的浓度高太多
但是
trypsin本身就是一种蛋白
这样子的作法
不会影响细胞蛋白吗?
老师觉得不会
但是
因为跟先前用PBS刮下来测出的浓度差太多了
(用PBS的作法,浓度大约在200~300ug/ml，用trypsin的作法,浓度在800~1400ug/ml)
所以我还是很怀疑用trypsin萃蛋白的作法>"<
有人可以帮我解答吗?
谢谢大家~
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.120.130.200
1F：推 blence:我是讨厌trypsin用於收protein的,你考虑同样ug做WB给老师看 11/20 18:55
2F：推 vancent:如果没有要做和ATTACHMENT相关的PROTEIN应该比较没差 11/20 19:35
3F：→ vancent:可是我不管PROTEIN拿来做什麽实验~都是采用括的 11/20 19:36
4F：→ ricky31:我之前也用刮的,但是老师硬是要用trypsin打下来/m\ 11/20 19:40
5F：推 quatre2323:我做WB，都是用RIPA，再刮下来，不建议用trypsin 11/20 21:15
6F：推 zoom8080:buffer都还要加protease inhibitor了 trypsin再加进去.. 11/23 01:23
7F：→ zoom8080:根本意背道而驰 11/23 01:23