作者doio (基隆王)
看板Biotech
標題[討論] 如果只用一個RE切vector...
時間Wed Nov 12 23:51:55 2008
因為某些因素
只把vector用BamHI切一刀
再接Insert
如果transform的時候
有做control(vector only)
vector是不是有可能會自己接回來
circular form就可以被transform進去
這樣在control的plate上就會長很多colony了?
這個control是不是就不準了啊?
謝謝大家回答囉!
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 218.167.60.29
1F：推 ZnU:可做CIP 11/13 00:00
2F：→ doio:加了CIP以後 control還是長很多耶 一直不懂為什麼會這樣? 11/13 00:02
3F：推 dumras:如果CIP有做好的話 你control的plate應該都不會有東西 11/13 01:02
4F：推 tsubasawolfy:有跑膠確認RE活性? 11/13 01:14
5F：推 sGoat:我直覺你沒有切乾淨,請問切的條件?用了幾U去切? 11/13 08:21
6F：→ doio:跑膠確認是OK的 37度切3個鐘頭 final體積50ul應該是0.8U吧 11/13 23:24
7F：→ doio:(20U取2ul) 11/13 23:25
8F：推 sGoat:請問切完有冰過嗎(4度或-20度)?有的話接回去的機率會大增 11/14 15:36
9F：→ sGoat:最好的辦法是切完加熱55度5分鐘,transformation塗plate確認 11/14 15:38
10F：→ sGoat:要是切的很乾淨的話plate上不會長菌,跑膠不會很準 11/14 15:39
11F：→ doio:謝謝你的建議! 我會試試看的 11/14 20:34