作者doio (基隆王)
看板Biotech
标题[讨论] 如果只用一个RE切vector...
时间Wed Nov 12 23:51:55 2008
因为某些因素
只把vector用BamHI切一刀
再接Insert
如果transform的时候
有做control(vector only)
vector是不是有可能会自己接回来
circular form就可以被transform进去
这样在control的plate上就会长很多colony了?
这个control是不是就不准了啊?
谢谢大家回答罗!
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 218.167.60.29
1F：推 ZnU:可做CIP 11/13 00:00
2F：→ doio:加了CIP以後 control还是长很多耶 一直不懂为什麽会这样? 11/13 00:02
3F：推 dumras:如果CIP有做好的话 你control的plate应该都不会有东西 11/13 01:02
4F：推 tsubasawolfy:有跑胶确认RE活性? 11/13 01:14
5F：推 sGoat:我直觉你没有切乾净,请问切的条件?用了几U去切? 11/13 08:21
6F：→ doio:跑胶确认是OK的 37度切3个钟头 final体积50ul应该是0.8U吧 11/13 23:24
7F：→ doio:(20U取2ul) 11/13 23:25
8F：推 sGoat:请问切完有冰过吗(4度或-20度)?有的话接回去的机率会大增 11/14 15:36
9F：→ sGoat:最好的办法是切完加热55度5分钟,transformation涂plate确认 11/14 15:38
10F：→ sGoat:要是切的很乾净的话plate上不会长菌,跑胶不会很准 11/14 15:39
11F：→ doio:谢谢你的建议! 我会试试看的 11/14 20:34