作者onlyone0419 (期待)
看板Biotech
標題[求救] 分離小鼠脾臟Macrophage
時間Sun Nov 9 14:29:32 2008
請問有大大做過分離spleen macrophage的實驗嗎?
我是將spleen磨碎後
先用RBC lysis buffer將紅血球打破
wash 3次後用貼複的方式培養(RPMI-1640)
可是他就是不給我貼= =，不像腹腔Macrophage那麼會貼...
我1、2、4小時都有鏡檢，都幾乎沒貼
後來放整晚也不貼...
實在是傷腦筋@..@
希望有經驗的大師們能傾囊相授<(_ _)>
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◆ From: 134.208.25.219
※ 編輯: onlyone0419 來自: 134.208.25.219 (11/09 14:33)
1F：推 Nikio:考不考慮先在盤子上coating abs for macrophage receptors? 11/09 23:40
2F：→ Nikio:然後輕輕的把沒抓到的細胞洗掉，幾次後就蠻純了 11/09 23:41
3F：→ Nikio:古早的純化CD4細胞的方法，蠻管用的！不知道您適不適用？ 11/09 23:42
4F：推 oypicard:用flow or MACS sorting? 11/10 17:52
5F：推 SQRT:有需要去掉RBC嗎?RBC本來就不會貼了,何必去掉它?! 11/10 20:10
6F：→ onlyone0419:有PAPER說會影響他貼的效果@@ 11/10 23:45
7F：推 lovesteve:其實可以考慮用percoll or histopaque分的效果不錯 11/11 12:57
8F：→ onlyone0419:脾臟也能用Percool喔~? 11/11 22:00